大部分小鼠ELISA試劑盒檢測均以血清為標(biāo)本。

1.血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP 為標(biāo)記的小鼠ELISA試劑盒測定中，如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。

2.一般說來，在5 天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃，標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過長導(dǎo)致血清IgG 聚合，使間接法的試劑本底加深。

3.超過一周測定的需－20℃保存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡。

4.混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。

5.反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落，所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。

6.保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無菌操作，也可加入適當(dāng)防腐劑。

7.抗凝不完-全的標(biāo)本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽性，建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。

8.加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在小鼠ELISA試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出。

9.在建立小鼠ELISA試劑盒方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2 小時(shí)，產(chǎn)物的生成可達(dá)頂-峰。

10.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，小鼠ELISA試劑盒也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，反應(yīng)板不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。

11.應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。

12.由于公司的ELISA試劑盒溫育是在空氣浴中完成，采用水浴會(huì)造成值偏高或花板。

13.另外溫育中還有邊緣效應(yīng)，邊上的值會(huì)偏高，建議為了客觀的判斷結(jié)果，將質(zhì)控放在非邊緣位置。